荧光物质在紫外线照射下，能够发出可见的荧光。某些荧光物质在一定条件下，能与抗体发生结合，形成荧光标记抗体，荧光标记抗体再与抗原结合后，在荧光显微镜下观察，抗原抗体复合物呈现荧光而明显可见，称为荧光抗体技术。
目前常用的荧光物质有异硫氰酸荧光素（发绿色荧光）和罗丹明（发橙黄色荧光）。
荧光抗体染色方法主要有直接法和间接法两种。
（1）直接法
将待测抗原制成显微镜标本，在其上滴加已知荧光标记抗体。一定时间后，用缓冲液冲洗，再放在荧光显微镜下观察，若有相应的抗原存在，则会发出荧光。
此法可用于鉴定组织、细胞中的蛋白质和微生物，方法较简便。缺点是每检查一种抗原，必须制备与其相应的荧光标记抗体。
（2）间接法
先用未标记的特异性抗体处理涂片标本。如有相应抗原存在，则会与抗体形成复合物。然后再滴加荧光标记的抗免疫球蛋 白抗体（或称抗抗体），则荧光标记抗抗体与复合物中的抗体结合，从而显出荧光，为阳性反应。由于荧光物质不是直接标记抗体， 而是标记抗免疫球蛋 白的抗体，所以称为间接法。
间接法用一种荧光标记抗抗体，可以研究某种动物的各种免疫血清，灵敏度也比直接法高。
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