立博国际，立博官网，立博国际官网，立博指数，立博威廉，立博球探，立博论坛，立博网址-红细胞吸附法-病毒提纯方法
录入时间:2009-6-26 9:29:24
来源：青岛海博
所谓病毒的红细胞凝集反应，就是指病毒被红细胞表面粘蛋白吸附的现象。自Hirst发现流感病毒的红细胞凝集性质以来，随后相继发现其它一些动物病毒也有红细胞凝集性。Stanley证明，流感病毒在0℃时被红细胞吸附，而在37℃时却从红细胞上脱离下来的性质，从而将此方法应用于病毒提纯。 长春农牧大学应用醛化鸡红细胞吸附马流感病毒，取得较好效果。具体方法是： 采取鸡血，以无菌生理盐水洗涤3次后制成压积红细胞。另取福尔马林和生理盐水等量混合，制成福尔马林盐水。在2份福尔马林盐水中加入1份压积红细胞，充分振荡15分钟，置2～8℃冰箱内48h，每天振荡2～3次。届时取出，再振荡1次，后用700r/min离心5～10分钟，弃上清，再加20倍量生理盐水，振荡混合后置2～8℃冰箱过夜。弃上清，加入20]倍量生理盐水，如上洗涤3次。取沉淀红细胞，加入相当于初次压积红细胞量的生理盐水，]混匀后即可应用。 将马流感病毒感染的鸡胚尿囊液，作2]500r/min离心10分钟，吸取上清液。取保存于]2～8℃的病毒液100ml，加入2～8℃的醛化红细胞悬液6ml，充分振荡15分钟，立即放入冰箱内每2小时振荡1次，共2～3次，随后置冰箱中过夜，待其自然沉淀。次日吸出上清，如]其血凝价在1∶15以下，则证明已经充分吸附，此时即可进行释放，否则需再补加醛化红细]胞悬液继续吸附。 在已充分吸附病毒的醛化红细胞沉淀中，加入相当于原病毒液1/10量的5mol/L]NaCl10分钟。吸取上清液，即为浓缩病毒液，必要时可对已释放过病毒的醛化红细胞作第二次释放，方法同前。 上述吸附释放方法，可将病毒浓度提高10倍左右(以血凝效价表示)。
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