立博国际，立博官网，立博国际官网，立博指数，立博威廉，立博球探，立博论坛，立博网址-《水生微生物实验法》——从泥样中分离放线菌

水中放线菌无论在数量上或在种类上都比其他的细菌少得多。但在水、沉积物及浮游生物中都能分离到放线菌，如Kpucc 从海泥及浮游生物中分离到灰色放线菌、球孢放线菌及直线白色放线菌等三种。在淡水中也有多种放线菌，如游动放线菌属等。

1 ．培养基成分及其制法

① 葡萄糖酵母膏牛肉膏蛋白胨琼脂   即埃默森氏培养基．葡萄糖、酵母膏可减至每升l 克，也可省去氯化钠。此培养基适用于放线菌的分离、其成分如下：

葡萄糖10 克

酵母膏10 克

牛肉膏0.4克

蛋白胨4 克

NaCl （用子淡水种）2.5克

琼脂15 克

陈海水（用于咸水样品）

或蒸馏水（用于淡水样品）1000毫升

调pH 至7.2-7.4 , 121 ℃ 蒸汽下灭菌30 分钟，制成平板，备用。具体制法参考高氏1 号培养基。

② 高氏（Gause )1号斜面培养基，此种培养基适于放线菌的纯化培养。其成分如下；

淀粉（可溶性）20克

KNO3  1 克

MgO2·7H2O   0.5 克

FeSO4·7H2O   0.01 克

K2HPO4   0.5 克

NaCl 0.5克

琼脂20克

陈海水或蒸馏水1000毫升

pH 7.2-7.4

用少量水将淀粉调成糊状．取500 毫升煮沸水注入糊状淀粉中，边加边搅拌，使其溶解，除琼脂外，加入其他成分．溶解后加水至1000 毫升．加入琼脂，并使其溶化，调pH ，分装于试管，112 ℃ 蒸汽下灭菌30 分钟，摆成斜面，备用．

2 ．分离步骤

① 按上法取10 克泥样，溶解于90 毫升无菌海水或无菌水中．加10%酚10滴。边加边振荡，使酚及微生物分布均匀。酚在此能抑制细菌的生长。

② 以10倍稀释法将泥样冲稀至10^-2和10^-3的悬液．

③ 各取0.1毫升悬液放于淀粉铵平板培养基上．以弯曲玻棒涂匀，每个稀释度制2 个平板．

④ 倒放培养皿于25-30 ℃ 下培养7-15 天．

⑤ 观察菌落特征，挑取所需菌落，接种于高氏1 号斜面培养基作纯化培养。

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