附 录 A
(规范性附录)
常用培养基配方
A.1 营养琼脂
蛋白胨
牛肉膏
氯化钠(NaCl)
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 7.2~7.5
将各种成分溶解于蒸馏水内,调节pH,再加琼脂,加热溶化后分装。
适用于一般细菌培养和保藏。
A.2 芽孢杆菌培养基
蛋白胨
牛肉膏
土壤浸出液 250 mL
蒸馏水 750mL
琼脂 18.
土壤浸取液:土壤
其他同
适用于芽孢杆菌的保藏。
A.3 阿须贝氏(Ashby)培养基
磷酸二氢钾(KH2PO4)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
氯化钠(NaCl)
碳酸钙(CaCO3)
甘露醇(C6H14O6)
硫酸钙(CaSO4·2H2O)
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.8~7.0
同
用于固氮菌的培养。
A.4 根瘤菌培养基YM
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
氯化钠(NaCl)
甘露醇(C6H14O6)
酵母膏
0.5%刚果红溶液 5 mL
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.8~7.0
将各种营养成分溶解于蒸馏水内,调节pH后,加入刚果红溶液。再加琼脂,加热溶化后分装。
适用于根瘤菌的培养。
A.5 根瘤菌培养基 = 2 * ROMAN II
酵母粉
甘露醇(C6H14O6)
土壤浸出液 200 mL
琼脂
蒸馏水 800 mL
pH 7.2
土壤浸出液:土壤
其他同
适用于根瘤菌的保藏和培养。
A.6 硅酸盐细菌培养基
蔗糖(C12H22O11)
磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
碳酸钙(CaCO3)
三氯化铁(FeCl3·6H2O)
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 7.5~8.0
先将三氯化铁配制成5‰的溶液,按量加入,其他同
适用于硅酸盐细菌的培养。
A.7 固氮(茎瘤)根瘤菌培养基
乳酸钠(C3H5O3Na)
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)
磷酸二氢钾(KH2PO4)
氯化钠(NaCl)
氯化钙(CaCl2)
三氯化铁(FeCl3·6H2O)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
酵母膏
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.8~7.0
先将三氯化铁配制成4‰的溶液按量加入,其他同
适用于茎瘤根瘤菌的培养。
A.8 马丁培养基
磷酸二氢钾(KH2PO4)
葡萄糖(C6H12O6·H2O)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
蛋白胨
1%孟加拉红水溶液 3.3 mL
氯霉素
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
将营养成分用蒸馏水溶解后,按量加入1%孟加拉红水溶液,氯霉素先用少量乙醇溶解后加到培养基中。再加琼脂,加热溶化后分装。
适用于真菌的培养。
A.9 高氏合成一号琼脂
硝酸钾(KNO3)
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
氯化钠(NaCl)
硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)
可溶性淀粉(C6H10O5)n
重铬酸钾(K2Cr2O7)
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 7.2~7.4
淀粉用少量冷水调成糊状,加热溶解后加入。再加琼脂,加热溶化后分装,
适用于放线菌的培养。
A.10 联合固氮菌培养基
D-葡萄糖酸钠(C6H10NaO7)
磷酸二氢钾(KH2PO4)
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
酵母膏
氯化钠(NaCl)
氯化钙(CaCl2)
三氯化铁(FeCl3·6H2O)
钼酸钠(Na2MoO4)
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.8~7.0
将氯化钙配、钼酸钠分别配制成2‰的溶液,按量加入,其他同
适用于固氮螺菌的培养。
A.11 马铃薯葡萄糖琼脂培养基
马铃薯
葡萄糖(C6H12O6·H2O)
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
称取去皮马铃薯
适用于酵母菌的培养。
A.12 麦芽汁琼脂
12波林麦芽汁(Brix) 1 000 mL
琼脂
pH 5.4
将麦芽汁调至12波林的糖度,调节pH,加入琼脂,加热溶化后分装。
适用于酵母菌的培养和保藏。
A.13 乳酸细菌培养基(MRS)
蛋白胨
牛肉膏
酵母膏
柠檬酸氢二铵[(NH4)
葡萄糖(C6H12O6·H2O)
吐温80
乙酸钠(CH3COONa·3H2O)
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
硫酸锰(MnSO4·H2O)
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.2~6.6
将各种成分溶解于蒸馏水内,调节pH,再加琼脂,加热溶化后分装。
适用于乳酸菌的培养。
A.14 光合细菌培养基 = 1 * ROMAN I
酵母粉
蛋白胨
硫酸镁(MgSO4·7H2O)
氯化钙(CaCl2)
蒸馏水 1 000 mL
pH 6.8~7.0
同
适用于光合细菌的培养。
A.15 光合细菌培养基 = 2 * ROMAN II
溶液 = 1 * ROMAN I
氯化钙(CaCl2) 75 mg
乙酸钠(CH3COONa)
烟酸 40 mg
氯化钠(NaCl)
生物素 40 mg
酵母膏
硫胺素 40 mg
氯化镁(MgCl2) 200 mg
乙二胺四乙酸铁(EDTA-Fe)溶液 5 mL
微量元素溶液 1 mL
蒸馏水 800mL
溶液 = 2 * ROMAN II
磷酸二氢钾(KH2PO4) 600 mg
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)
蒸馏水 200 mL
将溶液 = 1 * ROMAN I、溶液 = 2 * ROMAN II分别于
微量元素溶液:
乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2O8·2H2O)
硼酸(H3BO3) 100 mg
氯化锌(ZnCl2) 100 mg
高钼酸钠(Na2MoO4·2H2O) 20 mg
氯化铜(CuCl2) 10 mg
硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)
氯化钴(CoCl2·6H2O) 100 mg
氯化锰(MnCl2·4H2O) 100 mg
氯化镍(NiCl2·6H2O) 20 mg
亚硒酸钠(Na2SeO3) 1 mg
蒸馏水 1 000 mL
乙二胺四乙酸铁(EDTA-Fe)溶液:
乙二胺四乙酸铁(EDTA-Na2)
硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)
蒸馏水 1 000 mL
乙二胺四乙酸铁(EDTA-Fe)溶液需要通气过夜,维生素类物质要过滤除菌后按量加入到培养基中。。
适用于光合细菌的培养。
A.16 乳糖胆盐发酵培养基(用于大肠菌群初步发酵)
蛋白胨
猪胆盐
乳糖
0.04%溴甲酚紫溶液 25.0 mL
蒸馏水 1 000 mL
pH 7.2~7.4
将各种成分溶解于蒸馏水内,调节pH,然后加入溴甲酚紫溶液,分装到试管中,并放入小倒管。
用于乳糖发酵实验。
A.17 伊红美蓝琼脂
蛋白胨
乳糖
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)
2%伊红水溶液 20.0 mL
0.65%美蓝水溶液 10.0 mL
琼脂
蒸馏水 1 000 mL
pH 7..2~7.4
将蛋白胨、乳糖、磷酸盐溶解于蒸馏水内,调节pH,加入琼脂,加热溶解,分装。
用于大肠菌群的分离培养。
A.18 乳糖发酵培养基
蛋白胨
乳糖
0.04%溴甲酚紫溶液 25.0 mL
蒸馏水 1 000 mL
pH 7.2~7.4
将各种营养成分溶解于蒸馏水内,调节pH,然后加入溴甲酚紫溶液,分装至试管,并放入小倒管。
用于大肠菌群验证实验。
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