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录入时间:2011-2-22 10:01:23 来源:中华检验医学网

2005年6月下旬以来,四川省资阳、内江等地区相继发生了生猪疫情,我院检验科细菌室于7月21日收到由四川省疾病控制中心送来的患者和猪心、肝、肉等标本培养出来的未知细菌,立即进行病原菌分离鉴定,现报告如下:
                   材料和方法
一、材料
临床资料:7月21日,资阳、内江等地有近80多人急性发病,出现高热、头痛、全身中毒症状,重者出现中毒性休克、脑膜炎,最终死亡10余人。死者多数都是与生猪密切接触者。
二、方法
1、细菌分离:将从猪心、猪肝、人心、人血标本中培养出来的18株细菌转种血平板进行细菌纯培养,经35℃24小时培养后,菌落呈灰白色、细小、α溶血、易乳化。染色为革兰氏阳性球菌,呈单个或成双排列。
2、细菌生化鉴定:采用ATB rapid ID32 STREP快速链球菌鉴定系统(法国生物梅里埃公司提供)。用棉拭子将血平板上菌落刮下,用去离子蒸馏水配置成浊度相当于4个麦氏单位菌悬液(用ATB比浊仪测定)。直接接种55ul菌悬液于32项微量生化反应试条。36℃4—4.5小时需氧培养,用ATB仪进行鉴定分析。生化反应结果L-精氨酸(-),试卤灵-βD-吡喃葡萄糖苷(+),βD吡喃半乳糖苷(-),βD葡萄糖苷酸—(+),αD吡喃半乳糖苷(+),βD吡喃半乳糖苷-2环乙胺(-),D核糖(-),D甘露醇(-),D山梨醇(-),D乳糖(+),D海藻糖(+),D棉子糖(+),D蔗糖(-),L-阿拉伯糖(+),D阿拉伯糖醇(-),α环糊精(+),丙酮酸盐(-),L-丙氨酰基-L-苯氨酰基-L-脯氨酸(-),β奈酚胺(+),2-奈酚-βD-半乳糖苷(-),焦谷氨酸-β-奈酚胺(+),6-溴-2奈酚-N-乙酰-βD-葡萄糖胺(+),L-甘氨酰-L-色氨酸酶-β-奈酚胺(+),马尿酸盐(+),糖原(-),芽霉菌糖(+),D-麦芽糖(-),D-蜜二糖(-),D-松三糖(+),甲基-βD-吡喃葡萄糖苷(-),D塔格糖(-),4-邻硝基苯-βD吡喃甘露糖苷(-),脲素(-)。鉴定结果:猪链球菌II型(生化反应编码为23072563110,鉴定百分率为99.9%)。
3、药物敏感试验:采用ATBSTREP5链球菌药敏试条对鉴定出的猪链球菌进行药物敏感试验,用ATB分析仪进行药敏分析。首先将该菌配置成0.5麦氏单位菌悬液,取200ul于ATB血清肉汤培养基中,再取菌悬液于盛有抗生素的反应孔中(每孔加135ul),35℃24小时孵育。药敏结果:阿莫西林、氯霉素、克林霉素、红霉素、左氧氟沙星、青霉素、奎奴普叮/达福普叮、头孢噻肟、复方新诺明、万古霉素均敏感,四环素耐药。
                讨 论
猪链球菌引起的猪链球菌病属国家规定的二类动物疫病,是一种人畜共患传染病。链球菌分布广泛,常存在于健康的哺乳动物和人体内,在动物机体抵抗力降低和外部环境变化诱导下会引起动物和人发病。
在这次疫情中,我院首先从患者和生猪血液、脏器组织分离到猪链球菌II型,为四川省生猪疫情的流行病学调查提供了病原学依据。同时为猪链球菌感染性疾病的诊断、治疗、防控工作提供了重要实验室依据,也为临床微生物工作者对这些少见细菌的鉴定起到技术指导作用。
作者:刘华  喻华  周忠华  颜英俊   黄文方 四川省医学科学院.四川省人民医院检验科

 

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