原理：有的细菌能把硝酸盐还原为亚硝酸盐，而亚硝酸盐能和对氨基苯磺酸作用生成对重氮基苯磺酸，且对重氮基苯磺酸与α-萘胺作用能生成红色的化合物N-α-萘胺偶氮苯磺酸。
（一）适用于需氧菌的方法
培养基：
硝酸钾（不含NO2-） 0.2g
蛋白胨 5g
蒸馏水 1000ml
溶解，调节pH至7.4，分装试管。每管约5毫升，15磅高压灭菌15分钟。
试剂：
甲液 对位氨基苯磺酸 0.8g
5N醋酸溶液 100ml
乙液 α—萘胺 0.5g
5N醋酸溶液 100ml
方法：接种细菌后37℃培养4天，沿管壁加入甲液二滴与乙液二滴，当时观察。阳性者立刻呈红色。
（二）厌氧菌硝酸盐培养基法
培养基：
硝酸钾（不含NO2-，化学纯） 1g
磷酸氢二钠 2g
葡萄糖 1g
琼脂 1g
蛋白胨 20g
蒸馏水 1000ml
加热溶解，调整pH至7.2，过滤，分装试管，15磅高压灭菌15分钟。
方法：接种后作厌氧培养，试验方法和结果观察同上法，但培养1～2日即可。
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