原理：细菌对葡萄糖的分解有三种不同的类型。细菌仅在有氧环境中分解葡萄糖，称为氧化型；细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，称为发酵型；细菌在有氧或无氧环境中都不能分解葡萄糖，称为产碱型。利用该试验可了解细菌分解葡萄糖的代谢类型，故称为葡萄糖代谢类型鉴别试验或O/F试验。
方法：纯化的待检菌穿刺接种两支H L培养基，其中一支用灭菌的液体石蜡覆盖约0.5～1cm高度，以隔绝空气，称为闭管；另一支暴露于空气中，为开管。将两支培养基同时置37℃培养48小时后观察结果。
结果：若两管均不变色，为产碱型或不活动型，O/F试验为阴性；两管均产酸变为黄色为发酵型；仅开管产酸变黄，闭管不变色为氧化型。
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