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录入时间:2011-12-19 16:47:54 来源:互联网

【摘要】  目的 评价免疫印迹法立博球探论坛Ⅰ型和Ⅱ型幽门螺杆菌抗体的价值。 方法 采用免疫印迹法对门诊随诊患儿227例进行分型立博球探论坛。 结果 检出HP阳性85例,阳性率为37.44%,其中Ⅰ型58例,占68.23%;Ⅱ型27例,占31.76%。 结论 免疫印迹法立博球探论坛幽门螺杆菌抗体具有较高的敏感性和特异性。方法简单,时间短,对临床治疗有重要的指导意义。

【关键词】  幽门螺杆菌 免疫印迹法 空泡毒素 细胞毒素相关基因A

幽门螺杆菌(Helicobacter,简称HP)是慢性胃炎﹑消化性溃疡和非溃疡性消化不良的重要因素,是胃癌的危险因子。HP在全球人群的感染率超过50%,而且随着年龄的增加有递增趋势[1]。表达空泡毒素(VacA)蛋白和细胞毒素相关基因A(CagA)的HP菌株致病力强。本文对患儿血清用免疫印迹法进行立博球探论坛并分型,探讨不同型别HP与患者的关系,及时指导临床治疗。

  1  材料与方法

  1.1  样本  于2006年8月~2007年8月到我院门诊患儿,抽血2ml,留取血清待查。

  1.2  试剂与方法  采用免疫印迹法进行分型,试剂盒由上海元谷科技发展有限公司提供。本试剂原理是先将幽门螺杆菌的混合抗原用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小不同分开,再将其转移至硝酸纤维膜,如果被检血清有相应抗体,应用酶联免疫吸附反应,就会在抗原的相应位置出现显色区带,即可判断HP感染类型。

  1.3  抗体判断  将印迹膜上端起始线与标准带起始线对齐,在对应位置出现带型既可判断为相应的抗体:①128KD﹑116KD出现显色带或128KD单独出现,可同时伴有110KD显色判断为CagA(+)抗体;②95KD﹑91KD出现显色或95KD单独出现,可同时伴有87KD显色带判断为VacA(+)抗体;③66KD出现显色带判断为尿素酶B(UreB)(+)抗体;④30KD出现显色带判断为尿素酶A(UreA)(+)抗体。

  1.4  分析结果  ①CagA或VacA抗体同时阳性或任意一种阳性,为Ⅰ型HP感染;②仅出现尿素酶A和尿素酶B抗体阳性,为Ⅱ型HP感染;③CagA, VacA及Ureas三种抗体阴性,既为HP抗体阴性。

  2  结果

  2.1  227例患儿  HP感染85例,阳性率为37.44%,其中Ⅰ型58例,占68.23%;Ⅱ型27例,占31.76%,见表1。

  表1  227例患儿HP感染结果(略)

  2.2  不同年龄段HP感染情况  见表2。

  表2  1~14岁不同年龄段HP感染情况(略)

  3  讨论
   
  目前临床上根据HP菌株及是否表达相应蛋白将HP分为两种类型:Ⅰ型为产细胞毒素HP菌株,能产生空泡毒素和细胞毒素相关蛋白,其致病力强,能导致广泛的炎症,Ⅱ型为不能产生细胞毒素的HP,不含细胞毒素相关基因A(CagA),不表达VacA毒素和CagA蛋白,这类菌株毒性小,感染后一般仅引起轻度慢性浅表性胃炎而无明显的临床症状[2]。据文献[3,4]报道,CagA蛋白是Ⅰ型HP致病性的标志物,现已确认HP是慢性活动性胃炎﹑消化性溃疡﹑胃黏相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和胃癌的致病因素。1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构(WHO/IARC)将幽门螺杆菌定为Ⅰ型致癌原。HP作为胃癌的Ⅰ类致癌因子,其中CagA与 VacA是在致癌过程中关键的毒力因子。HP穿透粘液层在胃上皮细胞表面定居,对胃上皮细胞和胃粘膜屏障等造成破坏作用,刺激上皮细胞增殖,改变增殖与凋亡的关系。VacA可使上皮细胞空泡样变性﹑损伤﹑坏死及溃疡,CagA本身无细胞毒性,但与VacA的转录等功能有关。另外,我国HP成人感染率已达60%~80%[5],血清学检查绝大部分均为阳性,因此,HP进行分型立博球探论坛特别重要,能及时指导临床治疗。本文通过免疫印迹法对227例患儿进行CagA、VacA、UreA、UreB抗体立博球探论坛,结果显示:HP感染85例,阳性率为37.44%,略低于成人感染率[5],而且HP感染率随着年龄增加而增加,与文献[1]报道基本一致。免疫印迹法是一种可靠的诊断HP感染的非入侵性方法,它的特异性和敏感性都较高且方法简单,且能定性分析蛋白质各组分,与其它方法相比,具有操作简单易行不需要昂贵的仪器,安全准确等优点,特别适合不适宜进行胃镜检查或不需要胃镜检查的患者,病人易于接受,及时指导临床治疗并且可用于流行病学调查。

【参考文献】
    [1] 胡伏莲.幽门螺杆菌感染的流行病学[J].(总97《中国医刊》),2007,42(2):17~18.

  [2] 王蔚虹,胡伏莲.幽门螺杆菌的分子生物学[M].北京:中国科学技术出版社,1997,170.

  [3] 王思平.幽门螺杆菌VacA基因致病机理及胃十二指肠疾病的关系[J].国外医学消化系统疾病分册,1997,17(3):141.

  [4] 张尤力. 幽门螺杆菌VacA基因型和CagA基因及其表达产物[J]. 国外医学消化系统疾病分册,1997,17(3):141.

  [5] 蒋丽蓉,许幼如,张凤富.胃肠病患者幽门螺杆菌感染若干情况的研究[J].中国内镜杂志,1998,4(1):301.

 

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