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录入时间:2011-12-28 9:40:48 来源:互联网

 

 

    细胞和愈伤组织的形态发生,主要受外植体本身、培养基和培养环境等三大类因素的调控。

 

(一) 材料本身

 

   1.遗传型   不同植物种的器官分化明显不同,如胡萝卜、烟草和矮牵牛等植物易诱导形成,而禾谷类、豆类、棉花等较难。

 

   2.器官和部位   通常同一种植物的不同器官或组织所形成的愈伤组织,无论在生理上或形态上,其差别均不大。但是对有些植物而言,确有明显差异。如油菜的花器比叶、根等易于分化成苗,水稻和小麦幼穗的苗分化频率也比其他器官为高。

 

   3.年龄   年龄较幼的外植体,不仅易于诱导形成愈伤组织,而且也容易诱导分化成植株。年龄越老,当转移到分化培养基上生长时,其苗分化频率越低。因此在组织培养中,要及时转移已形成的愈伤组织进行分化培养,可大大提高苗的分化频率。

 

(二)培养基

 

    培养基的各种成分和物理性质,都对器官发生产生一定影响,但起决定作用的仍然是植物生长激素,特别是生长素和细胞分裂素的配比。

 

   1.生长激素   腺嘌呤/IAA的比例是控制芽和根形成的重要条件之一,腺嘌呤/IAA比例高时,有利于芽形成。而这一比例低时,有利于根形成。

 

不同生长素和细胞分裂素,对生根和长芽的效果是不同的。如NAA对生根的作用比IAAIBA的效果好,但用IAAIBA处理,产生的根比较健壮,而用NAA处理,产生的根则较纤细。24-D往往对生根不利,特别是在较高浓度下。KtBA能广泛地诱导芽的形成,但BA比激动素的效力大。玉米素的作用范围较窄,但对某些植物有特效。

 

     2.无机营养元素缺乏或过多或不足,也会影响细胞生长和分化。如生根培养要求无机离子浓度小一些。如有些植物要求的硝酸氮;而有些植物要求铵态氮。

 

3.有机成分  在培养基中加糖、VB1VPPVB2、肌醇和甘氨酸等,可以满足愈伤组织的生长和分化的要求。各种氨基酸和嘌呤、嘧啶类物质,可以促进器官分化。其中酪氨酸可明显增加烟草组织培养的器官形成。酰胺类往往有促进器官形成的作用。水解酪蛋白中含有多种氨基酸,促进器官分化。

 

糖的不同种类和浓度,对培养组织的增殖及器官分化均有明显影响。

 

加一些植物器官的汁液,如椰子汁、麦芽汁、酵母提取物、番茄汁、荸荠汁、马铃薯汁、青玉米汁等,它们不仅提供一些生理活性物质,而且也补充一些微量元素成分。其中用得最多且有效的是椰子汁。

 

4.物理性质   培养基的物理性质(固体状态或液体状态,渗透压和pH)对形态发生有明显的影响。

 

培养基中的渗透压,对细胞增殖和胚状体的形成都有十分明显的影响,在花药培养中受到普遍的重视。如油菜花药培养宜先放在高糖(910%)培养基中培养,有利于细胞增殖和胚状体的形成。

 

(三)培养环境条件

 

    1.光照   光对器官的作用是一种诱导反应。一定的光照对小苗的形成、根的发生、枝的分化和胚状体的形成有促进作用。

 

    2.温度    在组织培养2225℃的恒温条件,可较好地形成芽和根。但是很多资料表明,温度高低对器官发生的数量和质量仍有影响。

 

 

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