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（一）从健壮母株上，选取带芽或茎尖的茎段，先用70～75％的酒精浸30～60s，再用10％的次氯酸钠溶液浸泡10～15 min，或用0．1％升汞液浸5～7 min，最后用无菌水洗3～5次。

（二）剥取茎尖材料接种。为了培养无病毒苗，取的茎尖材料应小，一般为0．1～0．2㎜。为了加速无病毒材料的繁殖，或切取较大的茎尖，约0．3～0．5㎜大小，甚至带芽的较大茎段，如1～3㎜。茎尖的大小同培养的难易有关，大的分化率高，分化速度快。所以除了特殊的目的外，宁肯用较大的茎尖。

（三）把茎尖接种在MS或LS＋2mg∕LBA＋300～500mg∕L CH或LH＋3％蔗糖的培养基上，诱导芽的分化。在25～30℃和光照下，先培养7～10d，见茎尖膨大转绿，再培养在黑暗中，可加快分化和绿化苗的生长。一般在暗培养中增殖2～3代。随后要转入光照下，以使苗生长健壮。光强以1500～2000Lx为宜。

（四）把伸长的芽接种到MS＋0．5～1mg∕L? BA＋300 mg∕L CH或改良的MS＋4．4umolBA＋0．5～49umolGA3的培养基上，这时苗会长大并产生丛生苗。每4～8周可分别繁殖一次，每个月约可增殖5～10倍。

（五）切取2㎝以上的带顶芽的苗切段，插入1∕2MS或其它低盐培养基（如White和Nitsh）中，附加1mg∕LIAA、0．2mg∕LIBA和3mg∕LGA3，可有效地促进生根。

    对生根困难的苹果砧木M9的试管苗生根，以先接种在含有2 mg∕L IBA、162 mg∕L 根皮酚的LS培养基上，培养4～7d后，转入无激素的LS培养基，生根快而频率高。

（六）苹果的试管苗也可以不进行生根，而直接嫁接到苹果矮化砧木上，既可保持树体有良好的矮化特性，又可通过采用无病毒繁殖材料妥善地解决无病毒繁殖问题。

（七）生根苗移出进行砂培2～3周，最后在土壤中培养，其成活率可达26．7～56．9％。

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