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基于“三管”MPN 法，取检样25g（mL）加入装有225mL 缓冲蛋白胨水中，均质制成1:10 稀释液，用灭菌吸管吸取1:10 稀释液1 mL，注入含9mLBPW的试管内，振摇试管混匀，制备1:100 的稀释液。

另取1 mL 灭菌吸管，按上条操作依次制备10 倍递增稀释液，每递增稀释一次，换用1 支1 mL 灭菌吸管。

根据对检样污染情况的估计，选择三个连续的适宜稀释度，每个稀释度接种3 支含有9mL BPW 的试管，每管接种1 mL。置36 ℃±1 ℃恒温箱内，培养8 h～18 h。分别移取1mL 转种于10mLTTB，42℃±1℃培养18h～24h。

分离、鉴定方法同第一法。

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