供试品的控制菌检查应按经方法适用性试验确认的方法进行。
阳性对照试验 阳性对照试验方法同供试品的控制菌检查,对照菌的加量应不大于100cfu。阳性对照试验应检出相应的控制菌。
阴性对照试验 以稀释剂代替供试液照相应控制菌检查法检查，阴性对照试验应无菌生长。如果阴性对照有菌生长，应进行偏差调查。
耐胆盐革兰阴性菌(Bile-Tolerant Gram-Negative Bacteria)
供试液制备和预培养 取供试品，用胰酪大豆胨液体作为稀释剂照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法” （通则1105）制成1：10 供试液，混匀，在20～25℃培养，培养时间应使供试品中的细菌充分恢复但不增殖（约2 小时）。
未检出试验
除另有规定外，取相当于1g 或1mL 供试品的上述预培养物接种至肠道菌增菌液体培养基中，30～35℃培养24～48 小时后，划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～24 小时。如果平板上无菌落生长，判供试品未检出耐胆盐革兰阴性菌。
定量试验
选择和分离培养 取相当于0.1g、0.01g 和0.001g（或0.1mL、0.01mL 和0.001mL）供试品的预培养物或其稀释液分别接种至肠道菌增菌液体培养基中，30～35℃培养24～48 小时。上述每一培养物分别划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～24 小时。
结果判断 若紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上有菌落生长，则对应培养管为阳性，否则为阴性。根据各培养管检查结果，从表2 查对1g 或1ml 供试品中含有耐胆盐革兰阴性菌的最大可能数。
大肠埃希菌(Escherichia coli)
供试液制备和增菌培养 取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法” （通则1105）制成1：10 供试液。取相当于1g 或1mL 供试品的供试液，接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，30～35℃培养18～24 小时。
选择和分离培养 取上述预培养物1mL 接种至100mL 麦康凯液体培养基中，42～44℃培养24～48 小时。取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～72 小时。
结果判断 若麦康凯琼脂培养基平板上有菌落生长，应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验, 确证是否为大肠埃希菌；若麦康凯琼脂培养基平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，判供试品未检出大肠埃希菌。
沙门菌（Salmonella）
供试液制备和增菌培养 取10g 或10mL 供试品直接或处理后接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，30～35℃培养18～24 小时。
选择和分离培养 取上述预培养物0.1mL 接种至10mL RV 沙门增菌液体培养基中，30～35℃培养18～24 小时。取少量RV 沙门菌增菌液体培养物划线接种于木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～48 小时。
沙门菌在木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上生长良好，菌落为淡红色或无色、透明或半透明、中心有或无黑色。用接种针挑选疑似菌落于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养18～24 小时，或采用其它适宜方法进一步鉴定。
结果判断 若木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上有疑似菌落生长，且三糖铁琼脂培养基的斜面为红色、底层为黄色，或斜面黄色、底层黄色或黑色，应进一步进行适宜的鉴定试验, 确证是否为沙门菌。如果平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或三糖铁琼脂培养基的斜面未见红色、底层未见黄色；或斜面黄色、底层未见黄色黑色，判供试品未检出沙门菌。
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）
供试液制备和增菌培养 取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法” （通则1105）制成1：10 供试液。取相当于1g 或1mL 供试品的供试液，接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀。30～35℃培养18～24 小时。
选择和分离培养 取上述预培养物划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～72 小时。
取上述平板上生长的菌落进行氧化酶试验，或采用其它适宜方法进一步鉴定。
氧化酶试验 将洁净滤纸片置于平皿内,用无菌玻棒取上述平板上生长的菌落涂于滤纸片上，滴加新配制的1％二盐酸二甲基对苯二胺试液，在30 秒内若培养物呈粉红色并逐渐变为紫红色为氧化酶试验阳性,否则为阴性。
结果判断 若溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上有菌落生长，且氧化酶试验阳性，应进一步进行适宜的鉴定试验, 确证是否为铜绿假单胞菌。如果平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或氧化酶试验阴性，判供试品未检出铜绿假单胞菌。
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）
供试液制备和增菌培养 取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法” （通则1105）制成1：10 供试液。取相当于1g 或1mL 供试品的供试液，接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀。30～35℃培养18～24 小时。
选择和分离培养 取上述预培养物划线接种于甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上，30～35℃培养18～72 小时。
结果判断 若甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上有黄色菌落或外周有黄色环的白色菌落生长，应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验, 确证是否为金黄色葡萄球菌；若平板上没有与上述形态特征相符或疑似的菌落生长，或虽有相符或疑似的菌落生长但鉴定结果为阴性，判供试品未检出金黄色葡萄球菌。
梭菌（Clostridia）
供试液制备和热处理 取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法” （通则1105）制成1：10 供试液。取相当于1g 或1mL 供试品的供试液2 份，其中1 份置80℃保温10 分钟后迅速冷却。
选择和分离培养 将上述2 份供试液分别接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的梭菌增菌培养基中，置厌氧条件下30～35℃培养48 小时。取上述每一培养物少量，分别涂抹接种于哥伦比亚琼脂培养基平板上，置厌氧条件下30～35℃培养48～72 小时。
过氧化氢酶试验 取上述平板上生长的菌落，置洁净玻片上，滴加3%过氧化氢试液，若菌落表面有气泡产生,为过氧化氢酶试验阳性,否则为阴性。
结果判断 若哥伦比亚琼脂培养基平板上有带或不带芽孢的厌氧杆菌生长，且过氧化氢酶反应阴性的，应进一步进行适宜的鉴定试验, 确证是否为梭菌；如果哥伦比亚琼脂培养基平板上没有厌氧杆菌生长，或虽有相符或疑似的菌落生长但鉴定结果为阴性，或过氧化氢酶反应阳性，判供试品未检出梭菌。
白色念珠菌（Candida albicans）
供试液制备和增菌培养 取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法” （通则1105）制成1：10 供试液。取相当于1g 或1mL 供试品的供试液，接种到100mL 沙氏葡萄糖液体培养基中，混匀，30～35℃培养3～5 天。
选择和分离 取上述预培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，30～35℃培养24～48 小时。
白色念珠菌在沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的菌落呈乳白色，偶见淡黄色,表面光滑有浓酵母气味,培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱褶。挑取疑似菌落接种至念珠菌显色培养基平板上，培养24～48 小时（必要时延长至72 小时），或采用其它适宜方法进一步鉴定。
结果判断 若沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上有疑似菌落生长，且疑似菌在念珠菌显色培养基平板上生长的菌落阳性反应，应进一步进行适宜的鉴定试验, 确证是否为白色念珠菌；若沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或疑似菌在念珠菌显色培养基平板上生长的菌落呈阴性反应，判供试品未检出白色念珠菌。
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