立博国际，立博官网，立博国际官网，立博指数，立博威廉，立博球探，立博论坛，立博网址-致病性葡萄球菌的鉴定

1．产生金黄色色素。

2．对家兔或羊红细胞有溶血作用。

3．分解甘露醇，产酸不产气。

4．血浆凝固酶试验阳性。

5．耐热DNA 酶试验阳性。

血浆疑固酶试验

【原理】

  致病性金黄色葡萄球菌能产生一种血浆凝固酶，可使枸橼酸钠或肝素抗凝的人或兔等动物血浆发生凝固，凝固血浆沉积于菌体表面，阻碍吞噬细胞的吞噬：即使被吞噬也不易被杀死。它与葡萄球菌感染局限化有关。

【材料】

  金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌培养物各一支，兔血浆、生理盐水、小试管。

【方法】

1．取无菌试管三支，分别加入兔血浆，每支2~3ml。

2．以接种环从血琼脂平板上挑取二种葡萄球菌菌落，分别混悬于二支兔血浆内，另一支为对照。

3．将三支兔血浆放置37℃水浴箱内孵育2 小时。

4．取出观察结果，阳性为试管内血浆凝固成块状。

耐热DNA 酶试验

【原理】

  致病性葡萄球菌能产生DNA 酶，它可特异地分解DNA 的磷酸戊糖联结的磷酸二酯键；且有明显耐热性，经180℃15 分钟或60℃2 小时也不灭活。此酶最适pH9.0，在含DNA 基质的琼脂一Tris 缓冲液中(PH9.0)，随DNA 被分解指示剂甲苯胺蓝从蓝色变粉红色。

【材料】

  经100℃煮沸15 分钟后的金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌24 小时液体培养物；甲苯胺蓝-DNA-琼脂(PH9.0)。

【方法】

1．取装有3ml 甲苯胺蓝-DNA-琼脂培养基的小试管置沸水浴中溶化，浇小玻片一块(琼脂全部用完)，待琼脂冷却凝固后，以3mm 直径打孔器打2 个孔。

2．用无菌滴管吸取加热冷却后的金黄色葡萄球菌或表皮葡萄球菌菌液，加人不同的小孔中，置37℃培养2~3 小时后观察结果。

3．凡小孔周围出现透明粉红色小圈者为阳性，小孔周围仍为蓝色不透明者为阴性。

注：指示剂甲苯胺蓝在酸性中呈红色，在中性或弱碱性溶液中呈蓝色。

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