微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->微生物立博球探论坛方法和标准->立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-PCR技术

立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-PCR技术



录入时间:2015-4-8 9:44:57 来源:青岛海博生物

  PCR: Polymerase chain reaction,即聚合酶链反应是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术

立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-PCR技术的发展历史

  1985年关于PCR 的文章首次由美国科学家Kary Mullis等人在 《Science》杂志上发表 。

  1989年《Science》杂志报道了耐热性DNA多聚酶 Taq酶(生活在温泉中的水生嗜热杆菌内提取到的一种耐热的DNA聚合酶 )的发现,预示着分子时代的到来。12月《Science》杂志将PCR和它所使用的聚合酶命名为第一个“年度分子”。

1993年Kary Mullis 因PCR的发明获得诺贝尔化学奖。

立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-PCR技术的原理 

  遗传物质由细胞核、染色体、DNA(脱氧核糖核酸和磷酸链和碱基构成)、碱基(A、T、C、G)是按双链螺旋排列的,碱基序列的长度和排列的顺序决定了生物的多样性。比如人类体细胞中共有31亿个碱基对,按上述的0.1%的差,人和人之间有3百万个碱基对的差别。 

  PCR的基本工作原理就是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机理沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成。

  PCR反应的基本成分包括7种基本成分:模板DNA、特异性引物、热稳定DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸(dNTP)、二价阳离子、缓冲液及一价阳离子。基本反应步骤 :变性--退火--延伸。最后通过染料如EB染色DNA后在紫外灯下显色检出。

立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-PCR技术的注意事项

1、防止污染,建立良好的质量控制。操作时避免气溶胶产生,特别注意阳性样品的拿放,使用一次性耗材,穿戴手套并经常更换,永远在最后一步才加核酸,液体分装使用等。

2、引物设计合理。

3、Taq酶扩增错误率较高,大约1/100对碱基/20个循环。

4、镁离子浓度对反应效率的影响。

5、仪器稳定性,升降温速率,管子的密合度等。

6、RT-PCR注意防止RNA降解。

 

上一篇:稀释法平板法分离土壤中的微生物

下一篇:生活饮用水标准检验方法(微生物指标)所需培养基

相关文章:
MPC琼脂培养基原理和使用方法 mCPC培养基原理和使用方法
五种致泻大肠埃希氏菌目的基因PCR 扩增阳性结果 PCR立博球探论坛技术
诺如病毒pcr结果判定 立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-PCR技术的诞生与发展
致泻大肠埃希氏菌标本处理与多重PCR 巢式PCR
PCR 致病性副溶血性弧菌的立博球探论坛——PCR方法
首页 | 关于我们 | 网上商城 | 加入收藏 | 在线客服 | 网站地图| 联系我们
地址:青岛市城阳区高新区锦汇路1号A2栋
电话:400-0532-596 0532-66087762
66087762、81935169
传真:0532-81935080 66087775
邮箱:qdhbywg@vip.126.com

广东办事处

罗经理、温小姐

电话:020-87204426 13711177972

邮箱:LWN7972@126.com2

产品技术咨询
电话:13176865511 18562658263
13105190021
投诉与建议
电话:13105190021 13006536294
邮箱:hopebiol@163.com
©2001- 版权所有 青岛高科技工业园海博生物技术有限公司 鲁ICP备05018323号