立博国际，立博官网，立博国际官网，立博指数，立博威廉，立博球探，立博论坛，立博网址-四硫磺酸盐煌绿增菌液基础（TTB)原理及现象

用途：用于沙门氏菌选择性增菌培养(GB4789.28-2013，GB4789.4-2010，SN/T2206.1-2008和SN0170-92，ISO标准)。

原理：蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源和维生素，满足细菌生长的需求；氯化钠可维持均衡的渗透压；碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物；硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌（四硫磺酸钠是在培养基加入碘和碘化钾时形成），而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖；胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其它革兰氏阳性细菌。

操作步骤：

1、制备质控菌液。

2、接种

2.1混合菌的接种

在装有待测培养基的试管中接种10-100CFU的目标菌，并接种1000-5000CFU的非目标菌，接种总量1ml，同时接种两个平行管，混匀。同时分别将目标菌菌悬液（与试管接种同一稀释度）和非目标菌菌悬液（比试管接种小10-100倍稀释度）1ml倾注平板，接种两个平板，作接种量计数用，42±1℃培养18-24小时。

2.2非目标菌接种

在装有待测培养基的试管中接种1000-5000CFU的非目标菌，接种量1ml，同时接种两个平行管，混匀，42±1℃培养18-24小时。

3、培养液的接种

3.1混合菌培养液的接种

用10μL接种环取1环经培养后的混合菌培养液，换线接种到XLD上，每管接种一个平板，36±1℃培养18-24小时。

3.2非目标菌培养液的接种

吸取10μL经培养后的非目标菌培养液，均匀涂布接种到TSA上，每管接种一个平板。也可使用倾注法进行接种，36±1℃培养18-24小时。

4、记录实验结果

目标菌在选择性平板上的菌落应>10CFU，则表示待测液提培养基的生长率良好；非目标菌在非选择性平板上的菌落<100CFU，则表示待测液体培养基的选择性为良好。

微生物试验：

接种以下质控菌株，在42±1℃培养18-24小时：

图1-2  四硫磺酸盐煌绿增菌液基础（TTB)微生物质控结果

备注：a:伤寒沙门氏菌，b: 鼠伤寒沙门氏菌，c: 大肠埃希氏菌，d：金黄色葡萄球菌，e:空白对照

方法的局限性

本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

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