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王娟
录入时间:2018-11-20 13:52:27 来源：青岛海博生物

一、试验原理：

本培养基用于大肠杆菌的O157：H7的测定(SN/T0973-2000)。

胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；氯化钠可维持均衡的渗透压；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂；月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群细菌的生长。大肠埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β- D葡萄糖醛酸苷（4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG）的β糖醛酸苷键，使其水解，释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶；而致病性大肠杆菌(包括O157：H7)不具有葡萄糖醛酸苷酶，因而不会产生荧光。

二、培养基配方（g/L）：

胰蛋白胨	20.0
氯化钠	5.0
乳糖	5.0
磷酸氢二钾	2.75
磷酸二氢钾	2.75
月桂基硫酸钠	0.1
pH 6.8±0.2 25℃

三、操作步骤：

1、制备质控菌液。

2、把质控菌液加入试管中。

3、在36±1℃培养24小时，记录实验结果。

四、微生物试验结果：

接种以下质控菌株，在36±1℃培养18-24小时：

质控菌株	菌株编号	接种量（CFU）	生长情况	其他特征
大肠埃希氏菌	ATCC25922	>5000	+++	产气，有荧光
大肠埃希氏菌0157	ATCC35150	>5000	+++	产气，无荧光
伤寒沙门氏菌	ATCC14028	>5000	+++	不产气，无荧光
金黄色葡萄球菌	ATCC25923	>5000	+++	抑制

图1-2 月桂基硫酸盐蛋白胨MUG培养基微生物质控结果

备注：A：正常情况下拍摄，B：366nm紫外灯下拍摄；

a:大肠埃希氏菌O157，b: 大肠埃希氏菌，c: 伤寒沙门氏菌，d：金黄色葡萄球菌，e:空白对照

五、方法的局限性

本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

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