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立博国际,立博官网,立博国际官网,立博指数,立博威廉,立博球探,立博论坛,立博网址-甘露醇高盐琼脂培养基原理和使用方法

丁鑫鑫
录入时间:2019-9-27 14:11:47 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。

蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂。

二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

10.0

牛肉粉

1.0

D-甘露醇

10.0

氯化钠

75.0

酚红

0.025

琼脂

13.0

pH 7.4±0.2 25℃

三、试验方法:

粉体装培养基的使用:

1.称取本品109.0g,加入1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌煮沸1分钟。121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。

2.使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

3.制备质控菌液。

4.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

5.用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

6.36±1℃倒置培养基培养24-48小时,记录实验结果。

四、结果观察与解释:

接种以下质控菌株,36±1℃倒置培养基培养24-48小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

100-1000

/

半定量

G≤1

部分或完全抑制

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

100-1000

/

半定量

G≤1

部分或完全抑制

表皮葡萄球菌

CMCC(B)26069

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

红色菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC6538

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

黄色菌落,菌落周围黄色

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

黄色菌落,菌落周围黄色


图1-2 甘露醇高盐琼脂微生物质控结果

备注:a:金黄色葡萄球菌(CMCC(B)26003),b:表皮葡萄球菌,c:大肠埃希氏菌,d:金黄色葡萄球菌(ATCC6538),

e:沙门氏菌


五、注意事项:

本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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