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大肠杆菌／大肠菌群显色培养基（第二代）
E.Coli/Coliform Chromogenic Medium

用途：用于快速、准确同时立博球探论坛大肠杆菌和大肠菌群，培养24小时，大肠杆菌显蓝绿色-紫色,大肠菌群显红色

应用范围：大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代)是青岛海博生物公司再次改良的培养基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌和大肠菌群的快速立博球探论坛。大肠杆菌显蓝色至紫色，大肠菌群显红色，革兰氏阳性菌被抑制。

配方(g/L)：

特殊营养物质	33.0
显色剂	0.3
琼脂	13.0
pH 7.0±0.2 25℃

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。

用法：
称取本品 46.3g 加入 1000ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过 1 分钟。取1ml制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心，倾入冷却至 45-50℃ 培养基约 15ml，混匀，凝固后，再加入一层培养基进行履盖。

或冷却至 45-50℃ 时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在 37℃ 的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml,涂布于培养基上,36℃ 培养 18～24h。

操作步骤：
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液 1ml 加入冷却至 45-50℃ 显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36℃培养 18～24h，选用有 30～200 个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠菌群和大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色，大肠菌群为粉红色菌落，其它细菌为无色或黄色菌落 ;总大肠菌群=蓝色菌落+紫色菌落+粉红色菌落   大肠杆菌=蓝色菌落+紫色菌落;
   4、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上，36℃ 培养 12-16 小时，挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装 4种x4套)。
质量控制：
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色至淡粉红色。制备好的平板呈无色半透明固体培养基，稍有些沉淀物。
2、微生物试验
   在 36℃ 培养 18～24h 小时：

质控菌株	ATCC	生长情况	菌落颜色
金黄色葡萄球菌	25923	-/+	无色
大肠杆菌	25922	+++	蓝色
沙门氏菌	14028	+++	无色
阴沟肠杆菌	23355	+++	粉红色
产气肠杆菌	35029	+++	粉红色
弗氏柠檬酸盐杆菌	43864	+++	粉红色
肺炎克雷伯氏菌	10031	+++	粉红色

方法的局限性：
本培养基鉴定大肠菌群/大肠杆菌，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。
典型特征：
大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色，大肠菌群为粉红色菌落，其它细菌为无色菌落。

贮存：
制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，保存温度 2-8℃，注意避光保存。
失效：
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意：
此培养基仅供实验室使用。
参考文献：
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
3、LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bact riologique, en particulier des Enterobacteriaceae. Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102; 267-277 (1962).

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